QM100組織研磨儀在DNA提取中的應(yīng)用

實驗?zāi)康?/span>

對比五洲鼎創(chuàng)QM100高通量自動研磨儀與手工液氮法研磨后的新鮮組織樣本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差異，評估自動研磨儀的適用性。

實驗材料及試劑

1.  實驗材料： 將 10 例 FT 樣本分別用吸水紙吸干表面的水分后，稱重后分裝為2 管/例，20 mg±0.3 mg/管。

2.  實驗試劑： 天根DP422 DNA/ RNA共提試劑盒

實驗過程

1.  研磨

【自動研磨】向離心管內(nèi)加入 300 μl 裂解液。將離心管放于液氮中，冷凍處理。

液氮冷凍處理后的離心管固定于自動研磨儀適配器中，向離心管中加入 2 粒 3

mm 磁珠。小心將適配器正確安裝至自動研磨儀上。啟動儀器，研磨組織。研磨后，再向離心管中加入 300 μl 裂解液（裂解液總使用量為 600 μl） 。

【手工研磨】 取樣本放于研缽中，加入液氮后迅速研磨。將組織粉末轉(zhuǎn)移至離心管中，稱重后向其中加入 600 μl 裂解液。

2.  核酸提取、檢測及保存

將上述分別使用兩種研磨方法處理后的樣本，使用 DNA RNA 共提試劑盒同

時提取 DNA 和 RNA。使用微量分光光度計測定 DNA、 RNA 的濃度及純度。 DNA提取后于-20℃保存，RNA 于-80℃保存。

實驗結(jié)果

實驗結(jié)論

五洲鼎創(chuàng)QM100自動研磨儀處理與手工液氮研磨處理后提取 FT 的 DNA、RNA 在濃度、純度上均無顯著性差異（成對檢驗 P>0.05） 。但手工研磨有較大的樣本損失率，對于DNA提取濃度較低的樣品來說，自動研磨儀可以做到樣品0損失，在DNA提取上有著明顯的優(yōu)勢，且手工處理的過程復(fù)雜、易交叉污染，操作所用時間等方面均不及QM100自動研磨儀，因此QM100高通量組織研磨儀對于DNA提取工作相對于手工研磨處理有很大優(yōu)勢。